離子色譜柱是一款高容量氫氧根體系色譜柱，用于分析疏水性離子（包括多磷酸鹽，硫氰酸鹽, 硫代硫酸鹽, 高氯酸鹽） 和多價陰離子（包括多磷酸鹽和聚羧酸鋅）。

離子色譜柱一般比常規高效液相色譜分析柱價格要貴很多，但如果正常使用，離子色譜柱也可以有很長的使用壽命，因此對離子色譜的維護和清洗十分重要。

一、陰離子交換色譜柱

1.操作壓力

離子交(jiao)換色譜(pu)(pu)柱的操作壓力不(bu)能超過，色譜(pu)(pu)柱說明書中有規定的大壓力，否則會造成色譜(pu)(pu)不(bu)可逆(ni)損失。

2.色譜柱的啟動

采用標(biao)準淋洗(xi)液（一般(ban)指等淋洗(xi)條件(jian)）使(shi)淋洗(xi)達到平衡后，進行色譜標(biao)準陰離子的測試分離度和(he)重現性。

3.色譜柱的貯放

一般情(qing)況(kuang)下，可以(yi)采用(yong)標準淋洗(xi)液(ye)(ye)作為貯(zhu)放液(ye)(ye)，長期貯(zhu)放需要將(jiang)色譜(pu)(pu)柱(zhu)兩端密封。但對于非抑制(zhi)型離子(zi)(zi)色譜(pu)(pu)柱(zhu)或早(zao)期的抑制(zhi)型離子(zi)(zi)色譜(pu)(pu)柱(zhu)，由于所用(yong)淋洗(xi)液(ye)(ye)比較接近中性，用(yong)淋洗(xi)液(ye)(ye)貯(zhu)放易于長霉(mei)，因此(ci)需要用(yong)高pH的溶(rong)液(ye)(ye)（如0.1 M NaOH）作貯(zhu)放液(ye)(ye)，或者的淋洗(xi)液(ye)(ye)中加入防(fang)霉(mei)劑（如疊(die)代(dai)氮）作貯(zhu)備液(ye)(ye)。

4.色譜柱的清洗

對于(yu)陰離子色(se)(se)譜(pu)，通用有(you)三種清(qing)(qing)洗(xi)方式(shi)，分(fen)別用于(yu)清(qing)(qing)洗(xi)酸溶(rong)性(xing)、堿溶(rong)性(xing)或有(you)機(ji)(ji)污染物，在(zai)清(qing)(qing)洗(xi)過(guo)(guo)程中(zhong)必須要確(que)保嚴格按(an)照(zhao)清(qing)(qing)洗(xi)過(guo)(guo)程進行(xing)，否(fou)則會引起色(se)(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)的(de)(de)局部高壓而損壞色(se)(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)。對于(yu)有(you)機(ji)(ji)溶(rong)劑清(qing)(qing)洗(xi)色(se)(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)，需(xu)要逐步(bu)減少有(you)機(ji)(ji)溶(rong)劑的(de)(de)量以避免由于(yu)混和(he)而造成(cheng)的(de)(de)流動相粘度的(de)(de)變化。

(1)選擇合適的清(qing)洗溶劑(ji)

a.      對低價親水污染物(wu)：用10倍(bei)的(de)淋洗液(ye)；

b.      對高價親水污染物：用(yong)1到3M的(de)鹽酸作淋(lin)洗液(ye)；

c.      對(dui)金屬(shu)污染物：會(hui)引(yin)起色譜峰不對(dui)稱性，如鐵(tie)離(li)子會(hui)引(yin)起硫(liu)酸(suan)根和(he)磷(lin)酸(suan)根的拖(tuo)尾，鋁會(hui)引(yin)起磷(lin)酸(suan)根回收率降低(di)，可采用絡合劑酸(suan)類，如0.2M 草酸(suan);

d.      有(you)(you)機(ji)(ji)污染物：有(you)(you)機(ji)(ji)污染物會(hui)引起(qi)色(se)譜(pu)柱(zhu)效降低，可以采(cai)用(yong)兼(jian)容的(de)(de)有(you)(you)機(ji)(ji)溶(rong)劑清洗，有(you)(you)時也可以采(cai)用(yong)高濃(nong)度的(de)(de)鹽酸與有(you)(you)機(ji)(ji)溶(rong)劑混(hun)(hun)合清洗則更為有(you)(you)效，如(ru)200mM鹽酸和80%乙腈(jing)，但要(yao)注(zhu)意(yi)這種溶(rong)液要(yao)混(hun)(hun)合立即使用(yong)，長(chang)時間混(hun)(hun)合會(hui)造(zao)成酸的(de)(de)分解并且損壞色(se)譜(pu)柱(zhu)。要(yao)特別(bie)注(zhu)意(yi)色(se)譜(pu)柱(zhu)有(you)(you)機(ji)(ji)兼(jian)容性，如(ru)果該色(se)譜(pu)柱(zhu)只能(neng)對15%的(de)(de)有(you)(you)機(ji)(ji)溶(rong)劑兼(jian)容，這時有(you)(you)機(ji)(ji)溶(rong)劑濃(nong)度就不能(neng)超過15%。

(2)清洗過程

a.      配(pei)制500mL合(he)適的(de)清洗溶液(ye)；

b.      斷開(kai)抑制器中(zhong)，分(fen)別清(qing)洗保護柱(zhu)和分(fen)離柱(zhu)，如果分(fen)離柱(zhu)和保護柱(zhu)串聯清(qing)洗，則(ze)將保護柱(zhu)接在分(fen)離柱(zhu)之后；

c.      設置流速對(dui)2mm色譜柱采(cai)用(yong)0.5mL/min,而對(dui)4mm色譜柱采(cai)用(yong)1mL/min；

d.      用二次(ci)去離子水沖洗色譜(pu)柱(zhu)15分鐘；

e.      用(yong)清(qing)洗液(ye)清(qing)洗色譜柱60分鐘；

f.       用二次(ci)去離子水沖洗色譜(pu)柱15分鐘(zhong)；

g.       連(lian)接抑制器，用淋(lin)洗液平(ping)衡色(se)譜柱(zhu)。.

二、陽離子交換色譜柱

陽離子(zi)色(se)譜(pu)柱(zhu)的操作(zuo)(zuo)壓力，啟動和貯放(fang)基本與陰離子(zi)色(se)譜(pu)柱(zhu)相似，一般陽離子(zi)色(se)譜(pu)貯放(fang)液均采用淋洗液，但于羧(suo)酸型(xing)陽離子(zi)色(se)譜(pu)柱(zhu)，為了避(bi)免色(se)譜(pu)固定相產(chan)生酯不能采用醇類作(zuo)(zuo)為流(liu)動相成分，一般也不用堿作(zuo)(zuo)為流(liu)動相成分，特別是硅膠(jiao)型(xing)基質(zhi)的固定相。

1．色譜柱的清洗

對于(yu)色譜柱的清洗，主要分(fen)兩種情況(kuang)

(1)高價陽(yang)離(li)子(zi)和酸(suan)溶性(xing)組(zu)分的清洗

a.       配(pei)制(zhi)1M HCl清洗液（注意不(bu)能(neng)用硝(xiao)酸代替鹽酸，硝(xiao)酸不(bu)能(neng)有(you)效(xiao)去除(chu)鐵離子，也不(bu)以用醇或堿溶液）;

b.      ; 斷開抑(yi)制器，如果(guo)系統含有保護柱(zhu)(zhu)和分離(li)柱(zhu)(zhu)，將保護柱(zhu)(zhu)接在分離(li)柱(zhu)(zhu)之后;

c.       設置泵的(de)流(liu)速對4mm色譜柱(zhu)為(wei)1.0 mL/min，對2mm色譜柱(zhu)為(wei)0.5mL/min;

d.       用10 mM HCl沖洗色譜柱15分鐘;

e.       用清洗液(ye)（1 M HCl）通色譜(pu)柱60分鐘;

f.       用(yong)10 mM HCl沖洗色譜柱;

g.       用淋洗液平衡色譜柱30分鐘;

h.       重新連接抑制器到色(se)譜(pu)柱(zhu)和保護柱(zhu);

(2)親脂(zhi)性(xing)陽離子(zi)和有機污(wu)染(ran)物

a. ;      斷開抑(yi)制器，將色譜柱直接與(yu)泵相連;

b.       設(she)置泵的流速(su)對(dui)4mm色譜(pu)柱為(wei)1.0 mL/min，對(dui)2mm色譜(pu)柱為(wei)0.5mL/min;

c.       如(ru)果對梯度泵分(fen)別設置100 mM HCl和90%乙腈，用梯度清(qing)洗色(se)譜柱(zhu)，如(ru)果沒有梯度泵則分(fen)別用這兩(liang)種清(qing)洗液清(qing)洗色(se)譜柱(zhu);

d.       重新連接色譜(pu)(pu)柱，用淋(lin)洗液(ye)重新平衡色譜(pu)(pu)柱。

三、離子排斥色譜柱

1.色譜柱保護

色譜(pu)柱(zhu)(zhu)的(de)操作壓(ya)力，一般(ban)情況下離子排斥(chi)色譜(pu)柱(zhu)(zhu)的(de)操作壓(ya)力不是很(hen)高，因(yin)此要(yao)注意色譜(pu)柱(zhu)(zhu)的(de)大壓(ya)力和大流速，以免(mian)造成色譜(pu)柱(zhu)(zhu)不可逆損失。

色譜(pu)(pu)柱(zhu)的(de)啟動，對于新的(de)色譜(pu)(pu)柱(zhu)或者色譜(pu)(pu)柱(zhu)長期不(bu)用，用淋洗(xi)(xi)液沖洗(xi)(xi)20分鐘，清除色譜(pu)(pu)固定相中的(de)聚合物，以(yi)保護抑制器不(bu)被損壞。按測(ce)(ce)試色譜(pu)(pu)條件(jian)測(ce)(ce)試離(li)子(zi)排斥(chi)色譜(pu)(pu)柱(zhu)的(de)分離(li)度和重(zhong)現性。

2.色譜柱的貯放

對于(yu)長期貯放離子(zi)排斥色譜柱(zhu)(zhu)，需要用貯備液沖洗(xi)色譜柱(zhu)(zhu)10分鐘，擰緊色譜柱(zhu)(zhu)兩封口(kou)中。

3.色譜柱的清洗

(1)色譜柱的清洗溶液

a.      鐵離子(zi)污染會降低色譜(pu)峰高，可(ke)以用2至5 mM的檸檬(meng)酸(suan)清洗，如果(guo)仍有污染，可(ke)以用其它絡(luo)合物酸(suan)如草酸(suan)來清洗；

b.      有機污染物：可(ke)以用5%有機溶(rong)(rong)劑的(de)(de)(de)清洗(xi)，高不(bu)超過15%的(de)(de)(de)有機溶(rong)(rong)劑，同(tong)時也可(ke)在(zai)有機溶(rong)(rong)劑中加入5至10 mM HCl，通用的(de)(de)(de)清洗(xi)溶(rong)(rong)液為在(zai)10%乙腈中含5 mM七氟丁(ding)酸。

(2)色譜(pu)柱的清洗過(guo)程

a.      配制500mL清洗溶液;

b.      將抑制器與分離柱斷開;

c.      設置(zhi)泵(beng)的流速為0.5 mL/min;

d.      清(qing)洗溶液清(qing)洗色譜柱60分(fen)鐘;

e.      如果進行梯度(du)泵(beng)清洗，可以(yi)在30分鐘(zhong)后達到高的(de)有機(ji)(ji)溶(rong)劑濃(nong)度(du)，清洗30分鐘(zhong)后，逐步減少有機(ji)(ji)溶(rong)劑的(de)濃(nong)度(du);

f.       重(zhong)新(xin)連接抑制器(qi);

g.      用常規淋洗液平衡色譜柱進行正常操作。

四、離子對色譜柱

1.色譜柱的保護

色譜柱操作壓(ya)力(li)(li)不能超過大壓(ya)力(li)(li)，需要控(kong)制壓(ya)力(li)(li)和(he)流(liu)速。

開始使用(yong)前，用(yong)淋洗(xi)液(ye)沖洗(xi)平(ping)衡色(se)譜柱，用(yong)標準溶液(ye)檢查色(se)譜的分離度和重現(xian)性(xing)。

2.色譜柱的貯放

對于(yu)長期貯放離子排斥色譜(pu)(pu)柱(zhu)，需要用貯備液(ye)沖洗色譜(pu)(pu)柱(zhu)10分(fen)鐘，擰緊色譜(pu)(pu)柱(zhu)兩封口(kou)中。

3.色譜柱的清洗

(1)色(se)譜柱的清(qing)洗溶液

a.      高濃度的氫氧化物溶液(ye)如10倍(bei)的淋(lin)洗液(ye)用于去除低價(jia)親水性污染(ran)物;

b.      用1至3 M HCl去除高(gao)價親水性離(li)子;

c.      金屬污染(ran)物(wu)會影(ying)響色譜峰形/改變被測物(wu)的回(hui)收率。如(ru)鐵(tie)的污染(ran)會導致多(duo)聚磷酸鹽的峰高減(jian)少，然而通過連接注射多(duo)聚磷酸樣品(pin)，可以去除鐵(tie)離(li)子，也可以用1至3M HCl去除金屬污染(ran)物(wu)，如(ru)果用酸處(chu)理仍不能除去污染(ran)物(wu)，可以采用螯合劑如(ru)0.2 M 草酸來處(chu)理;

d.      有機污(wu)染物指非(fei)離子化合物或(huo)親脂性化合物，可以采用(yong)兼容的有機溶劑去除;

e.      在用(yong)有機(ji)溶劑清(qing)洗(xi)的同時，也可以加入高濃度(du)的酸(suan)如(ru)1至3M鹽酸(suan)，用(yong)酸(suan)來抑制電離及(ji)污染(ran)物(wu)與樹脂之間的相互作用(yong)。通(tong)用(yong)的清(qing)洗(xi)溶液(ye)為200mM HCl和(he)80%乙腈(jing)，溶液(ye)配(pei)制后立即使用(yong)，因(yin)為乙腈(jing)在酸(suan)性長期貯存條(tiao)件下會分解。

(2)色譜柱的清洗過(guo)程(cheng)

a.      配制500mL適合的清洗(xi)溶液；

b.      斷開(kai)抑制(zhi)器(qi)，將保護柱(zhu)接(jie)在分(fen)離柱(zhu)之后；

c.      設置泵的流(liu)速(su)，對2mm色(se)(se)譜柱選(xuan)用(yong)0.5 mL/min的流(liu)速(su)，4mm的色(se)(se)譜柱選(xuan)用(yong)1mL/min的流(liu)速(su)；

d.      在去離(li)子水和80%乙腈沖洗(xi)色譜(pu)柱15分(fen)鐘；

e.      清洗色譜柱60分鐘；

f.       再(zai)用去(qu)離子水和80%乙(yi)腈沖(chong)洗(xi)色譜(pu)柱15分鐘；

g.      重新連接色譜柱和抑制器，平衡后進行正常操作。