的正確(que)使用和維護十分重(zhong)要，稍(shao)有(you)不慎就會(hui)降低柱效、縮短使用壽命甚至損(sun)壞。在色譜(pu)操作過程中，需要注意下列問(wen)題：

　　1.一般(ban)說來不能反沖(chong)，只有(you)生產者(zhe)指(zhi)明該(gai)柱(zhu)可以反沖(chong)時，才(cai)可以反沖(chong)除去留在(zai)柱(zhu)頭(tou)的(de)雜質。否則(ze)反沖(chong)會迅速降低(di)柱(zhu)效(xiao)。

　　2.應逐漸改(gai)變(bian)(bian)溶(rong)劑的組(zu)成(cheng)，特別(bie)是反相色譜中，不(bu)應直接從有機溶(rong)劑改(gai)變(bian)(bian)為全部(bu)是水，反之亦(yi)然。

　　3.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩(如前所述)。
 

　　4.選擇使用(yong)適宜的流(liu)動相(尤其是pH)，以(yi)避免固定相被破壞。有(you)時可(ke)以(yi)在進樣(yang)器前面連接一預柱(zhu)(zhu)，分析(xi)(xi)柱(zhu)(zhu)是鍵合硅(gui)膠(jiao)時，預柱(zhu)(zhu)為硅(gui)膠(jiao)，可(ke)使流(liu)動相在進入分析(xi)(xi)柱(zhu)(zhu)之前預先被硅(gui)膠(jiao)“飽和(he)”，避免分析(xi)(xi)柱(zhu)(zhu)中的硅(gui)膠(jiao)基(ji)質被溶解(jie)。

　　5.避免將基質復雜的(de)樣(yang)品(pin)尤其是生(sheng)物樣(yang)品(pin)直接注(zhu)入柱(zhu)(zhu)內，需要對樣(yang)品(pin)進(jin)行預處理(li)或(huo)者在進(jin)樣(yang)器和色譜柱(zhu)(zhu)之(zhi)間連(lian)接一(yi)保(bao)護(hu)柱(zhu)(zhu)。保(bao)護(hu)柱(zhu)(zhu)一(yi)般是填有相(xiang)似固定相(xiang)的(de)短(duan)柱(zhu)(zhu)。保(bao)護(hu)柱(zhu)(zhu)可以而且應該經常(chang)更(geng)換。

　　6.經常(chang)用強溶(rong)劑沖洗(xi)，清除(chu)保留在(zai)柱內的雜質。在(zai)進(jin)行清洗(xi)時(shi)，對流路系(xi)統中流動相的置換應(ying)以相混溶(rong)的溶(rong)劑逐漸過渡，每種流動相的體積(ji)應(ying)是柱體積(ji)的20倍(bei)左右，即(ji)常(chang)規分(fen)析需要50~75ml。

　　7.保存時應將柱(zhu)內充滿乙腈或(huo)甲醇，柱(zhu)接頭(tou)要擰緊，防止溶劑揮發干燥。**禁止將緩(huan)沖溶液留在柱(zhu)內靜置(zhi)過夜或(huo)更長時間。

　　8.使(shi)用(yong)過程中，如(ru)果(guo)壓力升高，一種可(ke)能(neng)是燒結濾(lv)片被堵塞(sai)，這(zhe)時應更換濾(lv)片或將其取出進(jin)(jin)行清(qing)洗;另一種可(ke)能(neng)是大(da)分子(zi)進(jin)(jin)入(ru)柱(zhu)內，使(shi)柱(zhu)頭被污染;如(ru)果(guo)柱(zhu)效降低或色譜(pu)峰變形，則可(ke)能(neng)柱(zhu)頭出現(xian)塌陷，死體積增大(da)。

　　在(zai)后兩種情況發生時，小心擰(ning)開柱接頭(tou)，用(yong)潔(jie)凈(jing)小鋼將(jiang)柱頭(tou)填(tian)料(liao)(liao)取出1~2mm高度(注意把被污染填(tian)料(liao)(liao)取凈(jing))再(zai)把柱內(nei)(nei)填(tian)料(liao)(liao)整平。然后用(yong)適當溶劑濕(shi)潤的固定(ding)相(xiang)(與(yu)柱內(nei)(nei)相(xiang)同)填(tian)滿色譜柱，壓(ya)平，再(zai)擰(ning)緊柱接頭(tou)。這(zhe)樣處理后柱效能得到改善，但是很難(nan)恢(hui)復到新柱的水(shui)平。

　　柱(zhu)子失(shi)效(xiao)通(tong)常是(shi)柱(zhu)端部分，在分析(xi)柱(zhu)前裝一根與分析(xi)柱(zhu)相同固(gu)定相的(de)(de)短柱(zhu)(5~30mm)，可(ke)以(yi)起到(dao)保護、延長柱(zhu)壽命(ming)的(de)(de)作用。采用保護柱(zhu)會損失(shi)一定的(de)(de)柱(zhu)效(xiao)，這是(shi)值(zhi)得的(de)(de)。

　　通常色譜柱(zhu)(zhu)壽(shou)命(ming)在(zai)正確使用(yong)時(shi)可(ke)達2年以(yi)上。以(yi)硅膠(jiao)為基質(zhi)的(de)(de)填(tian)料(liao)，只能在(zai)pH2~9范圍(wei)內使用(yong)。柱(zhu)(zhu)子(zi)使用(yong)一段時(shi)間(jian)(jian)后(hou)，可(ke)能有一些吸(xi)附(fu)作(zuo)用(yong)強的(de)(de)物(wu)質(zhi)保留(liu)于柱(zhu)(zhu)頂(ding)(ding)(ding)，特別是一些有色物(wu)質(zhi)更易(yi)看(kan)清被(bei)吸(xi)著在(zai)柱(zhu)(zhu)頂(ding)(ding)(ding)的(de)(de)填(tian)料(liao)上。新的(de)(de)在(zai)使用(yong)一段時(shi)間(jian)(jian)后(hou)柱(zhu)(zhu)頂(ding)(ding)(ding)填(tian)料(liao)可(ke)能塌(ta)陷，使柱(zhu)(zhu)效下降(jiang)，這時(shi)也可(ke)補(bu)加(jia)填(tian)料(liao)使柱(zhu)(zhu)效恢復。

　　每次工作完后，*好用(yong)洗脫(tuo)能力強的(de)洗脫(tuo)液(ye)沖洗，例如(ru)ODS柱(zhu)宜用(yong)甲(jia)醇(chun)沖洗至(zhi)基線平衡(heng)。當采用(yong)鹽緩沖溶液(ye)作流動相時，使(shi)用(yong)完后應用(yong)無鹽流動相沖洗。含(han)鹵族元素(氟、氯(lv)、溴)的(de)化合物可能會腐蝕不(bu)(bu)銹鋼管道，不(bu)(bu)宜長期與(yu)之接觸。裝(zhuang)在(zai)HPLC儀上柱(zhu)子如(ru)不(bu)(bu)經常使(shi)用(yong)，應每隔4~5天開(kai)機沖洗15分(fen)鐘。