液相色譜柱按照其色譜分離模式來分，大致可分為正相、反相、離子交換、疏水作用、體積排除、親和以及手性等類型。其中反相色譜柱是以鍵合非極性基團的載體為填充劑填充而成的色譜柱。

反相色譜柱鍵合相(xiang)主要包括：C18、C8、C4、Phenyl、aQ、等。對于(yu)以上反相(xiang)色譜柱，我們在(zai)使用及維護的時候可以按照同(tong)樣的方式：

1、在條件允許情況下，在使用前需要對新色譜柱(zhu)按照說明書方法(fa)進(jin)行柱(zhu)效(xiao)測(ce)試。以確保色譜柱(zhu)的(de)正常(chang)。

2、所有(you)硅膠基質(zhi)色譜柱使用(yong)溫度(du)應低于60℃。

3、樣品

建議將(jiang)樣(yang)品溶(rong)(rong)(rong)(rong)解(jie)在(zai)流(liu)動相(xiang)(xiang)(xiang)或(huo)極性相(xiang)(xiang)(xiang)近的溶(rong)(rong)(rong)(rong)劑(ji)中。如(ru)(ru)果(guo)使(shi)用梯度洗脫，則(ze)需(xu)要將(jiang)樣(yang)品溶(rong)(rong)(rong)(rong)解(jie)在(zai)初始流(liu)動相(xiang)(xiang)(xiang)或(huo)極性相(xiang)(xiang)(xiang)近的溶(rong)(rong)(rong)(rong)劑(ji)中。樣(yang)品溶(rong)(rong)(rong)(rong)液(ye)不應含有任何顆粒(li)物，使(shi)用0.5μm或(huo)更小(xiao)粒(li)徑(jing)的濾(lv)膜過濾(lv)。樣(yang)品溶(rong)(rong)(rong)(rong)液(ye)如(ru)(ru)果(guo)使(shi)用強溶(rong)(rong)(rong)(rong)劑(ji)（例如(ru)(ru)，流(liu)動相(xiang)(xiang)(xiang)為水，樣(yang)品溶(rong)(rong)(rong)(rong)劑(ji)為甲(jia)醇），為達到(dao)較好峰(feng)形(xing)，需(xu)要降低進樣(yang)量(liang)（以250x4.6mm規(gui)格為例，小(xiao)于10μL）。

4、流動相

所(suo)有(you)(you)(you)流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)，特別是含有(you)(you)(you)緩(huan)沖鹽的(de)流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)，建議(yi)當日實驗(yan)當日配制；如(ru)果(guo)使(shi)用了(le)前日配制的(de)流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)，請確保流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)pH值(zhi)沒有(you)(you)(you)變化，并確保流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)沒有(you)(you)(you)長菌。 流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)的(de)pH值(zhi)取(qu)決于(yu)您的(de)應用和色譜柱填料(liao)類型(xing)。我們建議(yi)在(zai)所(suo)有(you)(you)(you)的(de)色譜柱盡量在(zai)pH2~8范圍內(nei)使(shi)用。請盡量避免在(zai)常規流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)中使(shi)用很高比例(li)的(de)水（>95%）作為流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)，可能會(hui)造(zao)成保留時間的(de)不穩(wen)定(ding)或者色譜柱鍵合相(xiang)的(de)損(sun)害。如(ru)果(guo)使(shi)用高比例(li)水或者*水相(xiang)為流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)，建議(yi)使(shi)用親(qin)水柱，例(li)如(ru)Hypersil GOLD aQ、Syncronis aQ、AcclaimPolar Advantage Ⅱ等色譜柱。

5、色譜柱平衡

在進行分析(xi)之前，請使用(yong)至少20倍柱體(ti)積的流(liu)動相(xiang)沖(chong)洗色(se)譜(pu)柱，以使色(se)譜(pu)柱達到平衡。

色譜柱(zhu)的柱(zhu)體積可以(yi)通過以(yi)下公式估算：

V=0.68πr2

V為色(se)譜(pu)柱柱體積（mL），r為色(se)譜(pu)柱內徑（cm），L為色(se)譜(pu)柱長度（cm）。

6、色譜柱保護

對于“臟”的樣品(pin)以及組分未知的樣品(pin)，請盡量使用(yong)在線濾器或保護(hu)柱(zhu)，如果可能，使用(yong)SPE小柱(zhu)對樣品(pin)進(jin)行前(qian)處理是更好(hao)的選擇。上述做(zuo)法可以有效(xiao)延長色譜柱(zhu)使用(yong)壽命。

7、色譜柱清洗

在儲存色(se)(se)譜柱(zhu)(zhu)之前，請使(shi)(shi)用(yong)至少20倍柱(zhu)(zhu)體積的不(bu)帶緩沖鹽(yan)的流動相(xiang)沖洗色(se)(se)譜柱(zhu)(zhu)（去(qu)除緩沖鹽(yan)），再用(yong)更(geng)強(qiang)的溶劑沖洗色(se)(se)譜柱(zhu)(zhu)（去(qu)除強(qiang)保(bao)留成分，反相(xiang)色(se)(se)譜通常使(shi)(shi)用(yong)甲(jia)醇或乙(yi)腈(jing)），然后使(shi)(shi)用(yong)合(he)適的溶劑儲存色(se)(se)譜柱(zhu)(zhu)。

8、 色譜柱保存

反相色譜柱(zhu)，保存(cun)溶劑通常(chang)是含至少30% 有機(ji)相的(de)水溶液，也(ye)可在(zai)常(chang)規(gui)清洗(xi)后直接保存(cun)在(zai)有機(ji)相中。

如果(guo)需(xu)要(yao)長時(shi)間儲藏，則需(xu)要(yao)使(shi)用(yong)較高比(bi)例的有(you)機相(xiang)（有(you)機相(xiang)比(bi)例至(zhi)少(shao)大于(yu)50%）